PDA

Просмотр полной версии : 1. Объяните, пожалуйста, "на пальцах", что такое REAL- Time PCR. 2. Какие н...



Искатель
21.05.2004, 08:36
1. Объяните, пожалуйста, "на пальцах", что такое REAL- Time PCR. 2. Какие наиболее важные параметры для выбора ПЦР- оборудования? 3. Амплификатор и термоциклер - синонимы или есть нюансы? Заранее благодарна за ответ

Андрей
23.05.2004, 10:25
Искатель, реал тайм ПЦР - это технология, позволяющая следить за количеством наработанного продукта реакции в реальном времени после (и в течении) каждого цикла ПЦР. Для этого используются технологии типа Такман, молекулярные буи, скорпионы (все эти технологии основаны на присутствии двух флурофоров в рекции - например зонд меченный с двух сторон, как в такмане), или можно использовать краситель SYBR- gren (тут не надо внутреннего зонда). Существуют несколь амплификаторов (или термоциклеров - это одно и тоже) для реал тайм ПЦР - наиболее лучшие это фирм ABI, BioRad, Stratagen, MWG. Для выбора машини для риал тайм надо смотреть на оптику и детекторную систему (это самое главное), затем, может ли машина работать в малтиплексовом режиме, ну и конечно на скорость реакции (рампинг) и возможность использования реактивов разных компаний. Если конкретно скажешь для какие целей надо машина (генотипирование, или изучение генетической экспрессии), почему именно надо риал тайим а не обычная ну и т. д. - смогу рассказать более конкретно. Еще имей ввиду, что самая дешевая нормальная риал тайм машина будет стоить около 40 тыс долларов.